Є індикатором, чутливим до дії кислот.
Опис: речовина являє собою безколірні кристали, що погано розчиняються у воді, розчинний у 95 % спирті, ацетоні, хлороформі, розчинах лугів. Відомий як барвник, який змінює забарвлення (на червоний або рожевий) в залежності від рівня рН середовища. Раніше також використовувався в медицині як проносне (пурген).
В аналітичній хімії застосовується в кислотно-лужному титруванні і для визначення значення водневого показника при титруванні.
Тимолфталеин також може бути використаний в якості невидимих чорнил.